Tato lékopisná monografie se vztahuje na lék ampicilin, tablety. Lék musí splňovat požadavky monografie obecného lékopisu “Tablety” a požadavky níže.
Obsahuje množství ampicilinu (bezvodý ampicilin nebo trihydrát ampicilinu) odpovídající ne méně než 90,0 % a ne více než 110,0 % deklarovaného množství ampicilinu.
Popis. Obsah této části je uveden v souladu s požadavky monografie obecného lékopisu “Tablety”.
1. Spektrofotometrie. Absorpční spektra zkušebních a standardních roztoků v rozsahu vlnových délek od 230 do 350 nm by měla mít maximum při stejné vlnové délce (test „kvantitativní stanovení“).
2. Chromatografie na tenké vrstvě (OFS „chromatografie na tenké vrstvě“).
Talíř. TLC deska s vrstvou silanizovaného silikagelu.
Mobilní fáze (MP). Pyridin – voda – chloroform – methanol 1:30:80:90.
Testovací roztok. Vzorek práškových tablet ekvivalentních 20,0 mg ampicilinu se protřepe s 5,0 ml 0,1 M roztoku kyseliny chlorovodíkové a zfiltruje.
Referenční roztok A. Asi 20,0 mg standardního vzorku trihydrátu ampicilinu se rozpustí v 5,0 ml 0,1 M roztoku kyseliny chlorovodíkové.
Referenční roztok B. Asi 20,0 mg standardního vzorku trihydrátu amoxicilinu a asi 20,0 mg standardního vzorku trihydrátu ampicilinu se rozpustí v 5,0 ml 0,1 M roztoku kyseliny chlorovodíkové.
Na startovní čáru destičky se nanese 1 μl zkušebního roztoku (4 μg), referenční roztok A (4 μg) a referenční roztok B (4 μg standardních vzorků trihydrátu amoxicilinu a trihydrátu ampicilinu). Deska s nanesenými vzorky se suší na vzduchu, umístí do komory s PF a chromatografuje se vzestupnou metodou. Když čelo mobilní fáze překročí asi 80-90 % délky desky od startovní čáry, vyjme se z komory, suší se, dokud se neodstraní stopy rozpouštědel a postříká 0,2% roztokem ninhydrinu zahřátým na teplotě 130 °C po dobu 10 minut.
Vhodnost chromatografického systému. Chromatogram porovnávacího roztoku B by měl vykazovat dvě jasně oddělené adsorpční zóny.
Hlavní adsorpční zóna na chromatogramu zkoušeného roztoku by měla polohou, velikostí a intenzitou barvy odpovídat adsorpční zóně na chromatogramu porovnávacího roztoku A.
Rozpuštění. Stanovení se provádí v souladu s monografií obecného lékopisu „Rozpouštění pro pevné lékové formy“ spektrofotometrií (monografie obecného lékopisu „Spektrofotometrie v ultrafialových a viditelných oblastech“).
Objem rozpouštěcího média:
Rychlost otáčení mixéru:
Roztoky se připravují bezprostředně před použitím.
Roztok síranu měďnatého. 1 g síranu měďnatého se vloží do 3,93litrové odměrné baňky, rozpustí se ve vodě a objem roztoku se upraví po značku stejným rozpouštědlem.
Pufrovací roztok pH 5,2. Smíchejte 464 ml 0,1 M roztoku kyseliny citrónové s 536 ml 0,2 M roztoku hydrogenfosforečnanu sodného pH výsledného roztoku.
Tlumivý roztok síranu měďnatého. Do 1litrové odměrné baňky vložte 15 ml roztoku síranu měďnatého a upravte objem roztoku po značku pomocí tlumivého roztoku o pH 5,2.
Testovací roztok. Každý koš obsahující jednu tabletu se umístí do rozpouštěcí nádoby obsahující předehřáté rozpouštěcí médium. Po 45 minutách se odebere vzorek roztoku a zfiltruje se, přičemž se první podíly filtrátu vyhodí. Výsledný roztok se zředí tlumivým roztokem síranu měďnatého na koncentraci ampicilinu přibližně 0,025 mg/ml. 25 ml výsledného roztoku se umístí do 25ml odměrné baňky, těsně uzavře a zahřívá ve vodní lázni při teplotě 802 °C po dobu 30 minut. Poté rychle ochlaďte na pokojovou teplotu a v případě potřeby upravte objem roztoku vodou po značku.
Standardní roztok ampicilinu. Asi 50 mg (přesně odváženého) standardního vzorku bezvodého ampicilinu se vloží do 100 ml odměrné baňky, rozpustí se ve vodě a objem roztoku se upraví po značku stejným rozpouštědlem. 100 ml výsledného roztoku se umístí do 5,0 ml odměrné baňky a objem roztoku se upraví po značku tlumivým roztokem síranu měďnatého (II). 25 ml výsledného roztoku se vloží do 25ml odměrné baňky, těsně uzavře a zahřívá se ve vodní lázni při teplotě po dobu 30 minut. Poté rychle ochlaďte na pokojovou teplotu a v případě potřeby upravte objem roztoku vodou po značku.
Referenční roztok. Rozpouštěcí médium.
Optická hustota testovaného a standardního roztoku se měří na spektrofotometru při absorpčním maximu při vlnové délce 320 nm v kyvetě s tloušťkou vrstvy 1 cm.
Množství ampicilinu, které přešlo do roztoku, v procentech (X), se vypočítá pomocí vzorce:
kde je optická hustota zkušebního roztoku;
— optická hustota roztoku standardního vzorku ampicilinu;
— zvážená část standardního vzorku bezvodého ampicilinu, mg;
P-obsah ampicilinu ve standardním vzorku bezvodého ampicilinu,%;
L je deklarované množství ampicilinu v jedné tabletě, mg;
F je faktor ředění zkušebního roztoku.
Po 45 minutách by mělo do roztoku přejít alespoň 75 % (Q) ampicilinu.
Nečistoty pohlcující světlo. Stanovení se provádí spektrofotometrií (Monograph General Pharmacopoeia „Spectrophotometry in the ultrafialové a viditelné oblasti“).
Testovací roztok. Přesná odvážená část práškových tablet obsahující asi 0,15 g ampicilinu se kvantitativně umístí do odměrné baňky o objemu 50 ml, rozpustí se ve vodě a objem roztoku se upraví po značku stejným rozpouštědlem. Výsledný roztok se zfiltruje, první části filtrátu se vyhodí.
Optická hustota zkušebního roztoku se měří pomocí spektrofotometru při absorpčním maximu při vlnové délce 322 nm v kyvetě s tloušťkou vrstvy 1 cm. Měření optické hustoty se provádí bezprostředně po přípravě roztoků.
Optická hustota by neměla být větší než 0,2.
Související nečistoty. Stanovení se provádí metodou HPLC (OPS „High Performance Liquid Chromatography“).
Zkušební roztok a referenční roztoky se používají čerstvě připravené nebo skladované při teplotě 4 °C po dobu ne delší než XNUMX hodin.
Mobilní fáze A (PFA). Do 1litrové odměrné baňky se vloží 0,5 ml roztoku kyseliny octové 2 M, 50 ml roztoku dihydrogenfosforečnanu draselného 0,2 M, 50 ml acetonitrilu a objem roztoku se upraví vodou po značku.
Mobilní fáze B (PFB). Do 1litrové odměrné baňky se vloží 0,5 ml roztoku kyseliny octové 2 M, 50 ml roztoku dihydrogenfosforečnanu draselného 0,2 M, 400 ml acetonitrilu a objem roztoku se upraví vodou po značku.
Testovací roztok. Vzorek mletého tabletového prášku, ekvivalentní asi 31 mg ampicilinu, se umístí do 10 ml odměrné baňky, přidá se 5 ml PFA, objem se upraví po značku stejným rozpouštědlem a zfiltruje se.
Referenční roztok A. Asi 27,0 mg (přesně zváženo) standardního vzorku bezvodého ampicilinu se umístí do 50ml odměrné baňky, rozpustí se v PFA a objem roztoku se upraví po značku stejným rozpouštědlem.
Srovnávací roztok B. 1,0 ml porovnávacího roztoku A se vloží do 20ml odměrné baňky a objem roztoku PFA se upraví po značku.
Srovnávací roztok B. Odvážená část drceného tabletového prášku, ekvivalentní 0,2 g ampicilinu, se smíchá s 1 ml vody. Roztok se zahřívá na 60 °C po dobu 1 hodiny a ochladí se. 1 ml výsledného roztoku se umístí do 50 ml odměrné baňky a objem roztoku PFA se upraví po značku.
Řešení pro testování separační schopnosti chromatografického systému. 2 mg standardního vzorku cefradinu se umístí do 50ml odměrné baňky, rozpustí se v PFA a objem roztoku se upraví po značku stejným rozpouštědlem. 5 ml výsledného roztoku se smíchá s 5 ml porovnávacího roztoku A.
Цефрадин: (6R,7R)-7-[(2R)-2-амино-2-(циклогекса-1,4-диен-1-ил)ацетамидо]-3-метил-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота, CAS 66592-87-8.
25 x 0,46 cm, oktadecylsilyl silikagel pro chromatografii (C18), 5 um;
